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淺談凝膠成像分析系統組成及各部件性能

瀏覽次數:8023 發布日期:2015-1-8  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
     凝膠成像系統的基本骨包含:CCD相機,暗室和分析軟件。不過其功能不僅僅限于對瓊脂糠凝膠進行成像,現在的成像儀趨向于多功能化,還適用于蛋白膠、發熒光的膠、印跡膜和菌落平板等應用。
     在Western Blot方面,高性能的CCD分子成像系統能與膠片媲美。 CCD是電荷耦合器件(Charge Coupled Device)的英文名稱縮寫,是一種光電轉換器件。是凝膠圖像系統的核心部件。絕大多數對數碼相機都有一定的了解,不少人還是這方面的專家。有人把數碼相機的像素看得很重,但比較之后發現,有些400萬、500萬像素的相機拍出來的片子沒有300像素的機子拍出來的好,這是為什么?
     其實,影響凝膠成像的因素很多,衡量CCD好壞的指標,有分辨率,CCD尺寸,動態范圍,靈敏度,量子效率,信噪比等,其中像素數以及CCD尺寸是重要的指標。其實是說感光器件的面積大小,這里就包括了CCD感光器件的面積越大,也即CCD面積越大,捕獲的光子越多,感光性能越好,信噪比越低。 為了方便您更了解CCD的大小,現列舉目前市場上所應用的CCD規格如下:
    1英寸——靶面尺寸為寬12.7mm*高9.6mm,對角線16mm。
    2/3英寸——靶面尺寸為寬8.8mm*高6.6mm,對角線11mm。
    1/2英寸——靶面尺寸為寬6.4mm*高4.8mm,對角線8mm。
    1/3英寸——靶面尺寸為寬4.8mm*高3.6mm,對角線6mm。
    1/4英寸——靶面尺寸為寬3.2mm*高2.4mm,對角線4mm。
    CCD的分辨率由低到高: 從45萬左右,100萬左右,140萬左右,200萬左右,300萬左右,400萬左右,500萬左右,甚至還有更高的,根據CCD的溫度有可以分為常溫CCD相機和制冷CCD相機,制冷CCD:在相同滿井電子的CCD,降低CCD噪音,就能提高CCD的監測能力,熱或者暗電流對于CCD都是噪音,噪音在Cool CCD基本都可以被深度致冷的Peltier消除。在曝光超過5-10秒,CCD芯片就會發熱,沒有致冷設備的芯片,“熱”或者白的像素點就會遮蓋圖像,圖像到處可見雪花。CCD結構設計、數字化的方法等都會影響噪音的產生。當然通過改善凝膠成像系統結構、優化方法,同樣能減少噪音的產生。
    熒光及化學發光本身較弱,所以對CCD噪音的降低要求很高,應選用高分辨率數字冷卻CCD相機結合高通透鏡頭系統,使其能夠捕獲到信號極其微弱的熒光及化學發光樣品圖像,并且能夠最大程度的降低噪音,減少背景,提供出色的圖像清晰度。另外可選激發光源及多位濾鏡輪擴大了熒光/化學發光成像的應用范圍。所以一般在熒光及化學發光觀察時需要選擇制冷CCD。所以制冷CCD相機絕對是高端分子影像成像分析系統的未來的發展趨勢和必須要求。
發布者:上海培清科技有限公司
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