中性粒細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定方法

瀏覽次數(shù)：3130　發(fā)布日期：2014-4-30　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

中性粒細(xì)胞（polymorphonuclear leukocyte，PMN）的功能包括粘附、移動(dòng)、吞噬殺菌等，是機(jī)體天然免疫力的重要組成部分。

試劑及材料

1. 白色葡萄球菌

2. 肉湯培養(yǎng)基

3. 鹼性美藍(lán)液

操作方法

1. 菌液的制備將白色葡萄球菌接種于中，放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)12h左右；置水浴中加熱100℃ 10min殺死細(xì)菌，用無菌生理鹽水稀釋成6×10⁸ 細(xì)菌/ml備用；

2. 用血紅蛋白吸管吸取受試者耳垂或指血40μl，立即加入盛有20μl肝素（濃度為20U/ml）的潔凈凹玻片的凹孔內(nèi)，輕輕攪動(dòng)混勻，再加上述葡萄球菌菌液20μl充分混勻。然后置入鋪有濕紗布的有蓋容器內(nèi)（此容器先放37℃溫箱中預(yù)溫），在37℃溫箱中作用30min，其間每隔10min搖勻一次；

3. 作用完畢，取1小滴混合液置于潔凈無油污的載玻片一端，推成薄片。待干后，用甲醇固定4～5min，鹼性美藍(lán)液染2～3min，置油鏡下觀察。隨機(jī)計(jì)數(shù)100個(gè)中性粒細(xì)胞，分別記錄發(fā)生吞噬和未吞噬的白細(xì)胞數(shù)，對(duì)有吞噬作用的白細(xì)胞，應(yīng)同時(shí)記錄所吞噬的細(xì)菌數(shù)；

結(jié)果分析

吞噬細(xì)胞%=即100個(gè)中性粒細(xì)胞中吞噬有細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)；

吞噬指數(shù)=將100個(gè)中性粒細(xì)胞所吞噬的細(xì)菌總數(shù)除以100，得到每個(gè)白細(xì)胞吞噬細(xì)菌的平均數(shù)，即為吞噬指數(shù)。