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南模生物iPSC體外疾病模型研究平臺(tái)上線(xiàn)

瀏覽次數(shù):2528 發(fā)布日期:2023-1-6  來(lái)源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPS)具有類(lèi)似于胚胎干細(xì)胞的全能性,其能夠分化成特定的細(xì)胞,組織或器官。誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 iPS 技術(shù)具有巨大的潛在應(yīng)用價(jià)值,可以用于干細(xì)胞治療研究,構(gòu)建疾病模型,發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)或篩選新的藥物。近日南模生物推出的 iPS 疾病研究模型平臺(tái)擁有多年培養(yǎng)干細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn)和干細(xì)胞基因編輯技術(shù),已建立穩(wěn)定的iPS誘導(dǎo)系統(tǒng),可以提供高效的疾病研究模型。
 

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1. iPSC 體外疾病模型的優(yōu)勢(shì)

1. 體外誘導(dǎo)的 iPSC 細(xì)胞可無(wú)限擴(kuò)增和定向分化,有利于替代較難獲得的原代細(xì)胞系。

2. 患者體內(nèi)誘導(dǎo)出來(lái)的 iPSC 細(xì)胞,分化形成的類(lèi)器官,有利于大規(guī)模的進(jìn)行藥物篩選。

3. iPSC 細(xì)胞在體外更容易進(jìn)行基因編輯,誘導(dǎo)分化細(xì)胞可以高效模擬疾病的治療。

2. iPSC 體外疾病模型服務(wù)內(nèi)容及交付周期
 

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3. iPSC 體外疾病模型服務(wù)案例

3.1外周血單核細(xì)胞重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS)

通過(guò)密度梯度離心,將外周血中的單個(gè)核細(xì)胞分離出來(lái)。單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)體外擴(kuò)增后,電轉(zhuǎn)重編程質(zhì)粒 OCT3/4,SOX2,KLF4,L-MYC,LIN28。電轉(zhuǎn)第七天可見(jiàn)細(xì)胞貼壁,12-18 天 iPS 克隆逐漸形成,qPCR 驗(yàn)證 iPS細(xì)胞相關(guān)基因均有表達(dá)。
 

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注:A圖為紅系祖細(xì)胞重編程打靶day0;B圖為day7,細(xì)胞開(kāi)始貼壁;C圖為day12,iPS克隆開(kāi)始出現(xiàn);D圖為day18,iPS克隆長(zhǎng)成,邊緣清晰,細(xì)胞致密。

 

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qPCR 驗(yàn)證iPS細(xì)胞相關(guān)基因均有表達(dá)

 

 

3.2 iPS細(xì)胞和人胚胎干細(xì)胞的基因編輯

敲除示例:在基因CISH第三個(gè)外顯子內(nèi)選取sgRNA進(jìn)行基因編輯,移碼突變?cè)斐蒀ISH基因的敲除。
 

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hiPSC-CISH-KO編輯方案

 

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hiPSC-CISH-KO測(cè)序驗(yàn)證

 

敲入示例:在人iPS細(xì)胞 NANOG基因后插入TdTomato熒光蛋白。
 

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iPS-NANOG-2A-tdTomato編輯方案

 

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iPS-NANOG-2A-tdTomato熒光表達(dá)驗(yàn)證

 

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