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深藍云直播課堂:多重PCR實驗的實際操作與運用結合

瀏覽次數:3904 發布日期:2021-5-8  來源:本站 本站原創,轉載請注明出處

PCR技術以特異性的寡核苷酸引物放大擴增特定的DNA片段,一對引物在單次反應擴增單個基因。通常每個靶標分別進行檢測,即單重PCR反應,但當我們需要檢測多個靶標基因時,單重PCR費時費力同時無法排除不同樣品孔間的加樣差異,如內參基因的歸一化檢測,需要在同一反應管中檢測內參基因和目標基因,多重PCR實驗無疑是最簡單直接的解決方案。
 

多重PCR也稱復合PCR,是在常規PCR基礎上改進并發展起來的一種PCR擴增技術,即可在一個反應體系中加入兩對以上引物,同時擴增出多個核酸片段。在熒光定量PCR(qPCR)和數字PCR(digital PCR)技術中,多重PCR設計配合多熒光通道可以進行更多靶標的相對于標準品的檢測和直接的絕對定量檢測,既具有單重PCR的敏感性和特異性,同時又比單重PCR更加高效、快捷和經濟。

多重PCR實驗具體如何進行?又有哪些注意事項?實時熒光定量PCR和數字PCR如何和多重PCR結合?北京深藍云生物科技有限公司云課堂將為您答疑解惑。

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