近日，德國BMG公司與Promega公司合作推出了超靈敏發(fā)光活細(xì)胞實(shí)時(shí)監(jiān)測方案。該方案通過BMG多功能酶標(biāo)儀CLARIOstar Plus-ACU，在活細(xì)胞上結(jié)合NanoBRET 技術(shù)，對利用PROTACs降解靶標(biāo)蛋白的關(guān)鍵步驟可實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)實(shí)時(shí)監(jiān)測。

精準(zhǔn)實(shí)時(shí)監(jiān)測這些關(guān)鍵步驟，如PROTACs介導(dǎo)的三元復(fù)合物形成過程和靶標(biāo)蛋白泛素化及降解過程，對于精細(xì)優(yōu)化PROTACs分子，深入了解靶標(biāo)蛋白降解效率等至關(guān)重要。同時(shí)，這些關(guān)鍵步驟中的細(xì)胞內(nèi)源性靶標(biāo)蛋白，均可通過CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)融合HiBit蛋白標(biāo)簽，之后可利用NanoBRET技術(shù)在CLARIOstar Plus-ACU進(jìn)行超靈敏實(shí)時(shí)監(jiān)測。
 

該方案對即使很低濃度的PROTACs，也顯示出超靈敏的檢測效果。此類應(yīng)用方案可為更好地理解分子優(yōu)化策略，最終助力設(shè)計(jì)和研發(fā)出高效的PROTACs藥物提供極具應(yīng)用價(jià)值的解決方案。
 

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