人脂肪前體細胞(Human Preadipocytes,HPAd)來源于人脂肪組織,呈成纖維狀,經誘導可分化為成熟的脂肪細胞(Human Adipocytes,HAd)。HPAd來源的HAd常被用來研究胰島素誘導的葡萄糖轉運、生長激素增強的脂類分解以及肥胖基因的表達等。HPAd和HAd可用于體外研究肥胖的原因和治療、II型糖尿病以及心血管疾病的模型。有趣的是,源于人網膜脂肪組織的HPAd和HAd在脂類分解和leptin表達上與源于皮下脂肪組織的存在顯著差異。
眾所周知,原代細胞的轉染是不容易實現的,HPAd同樣如此,普通的轉染試劑,如脂質體等,基本轉不進去,即使用病毒感染,效率也很低。電轉染理論上可以作用于任何種類的細胞,但是由于技術的限制,電轉染技術一直未能在動物細胞領域廣泛應用。NEPA21采用全新設計的電轉程序,特別適用于難轉染細胞、離體組織或動物活體的轉染。配合獨有的電壓衰減(Voltage Decay)設計,NEPA21可在獲得高轉染效率的同時,提高細胞存活率。
2013年3月27日,華粵行細胞生物學團隊在南京醫科大學進行的人脂肪前體細胞進行的原位貼壁電轉DEMO,盡管電轉前細胞融匯度已經近乎100%,可是最佳轉染程序組的轉染效率仍能達到約35%,細胞存活率在95%以上。兩個課題組的老師對電轉染的效果給予了高度的評價。
3T3-L1(Mouse embryonic fibroblast - adipose like cell line)雖為脂肪前體細胞系,但是用普通的轉染方法,同樣不容易獲得較高的轉染效率。而電轉實驗結果的顯示(如下圖),NEPA21可以高效地轉染該種細胞及其分化成熟的脂肪細胞。
Preadipocytes, Fibroblast like before differentiation(In Suspension)
Adipocyte-like after differentiation(In Adherence)