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6710 次 qPCR擴增過程中影響Ct值的因素及解決辦法詳解 2022-4-27
導讀Ct值是熒光定量PCR重要的結果呈現形式，它被用于計算基因表達量差異或者基因拷貝數。那么熒光定量的Ct值多大被認為是合理？如何保證Ct值的有效范圍呢？ Ct值以及Ct值的作用：Ct值概念：也稱
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4241 次 實驗過程中核酸降解的預防手段與方法 2022-4-14
導語在實驗過程中，最心累的莫過于好不容易提取的核酸卻降解了。那么核酸為什么會發生降解呢，我們又該如何預防呢？關于核酸降解，你了解多少呢？讓我們一起對核酸降解一探究竟吧。 什么是核酸
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2288 次 移取PCR Master Mix對qPCR結果的準確性的影響 2022-3-30
Overview定量聚合酶鏈反應（qPCR）分析具有高靈敏度，這是其成功并廣泛應用于科學實驗室的最重要原因之一。然而，包括移液技術在內的許多因素都會對qPCR分析的結果產生影響。在進行基于PCR原理的
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1354 次 如何改進qPCR數據報告 2022-2-24
關于實時熒光定量PCR技術，最常見的應用是通過RT-qPCR進行基因表達分析、疾病診斷和管理（如病毒定量）、食品檢測（如轉基因或過敏原分析）以及動物或植物育種等研究。這種方法非常靈敏，因此為
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4230 次 影響qPCR最終效果的六個要素分析與解決方法 2021-12-14
實時熒光定量PCR：在PCR反應體系中加入熒光基團（探針或染料），利用熒光信號積累實時監測整個PCR反應過程，最后通過Cq或Ct值和標準曲線對起始模板進行絕對定量或相對定量分析。而評估熒光定量P
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7698 次 qPCR擴增曲線的問題綜述與解決方法總結 2021-12-1
大家好！首先跟大家做一個自我介紹：我是擴增曲線，來自熒光定量PCR，是用于描述qPCR動態進程的曲線，我有兩種形態，一種是線性圖譜：橫坐標是循環數，縱坐標是熒光強度值；另一種是對數圖譜：橫
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1724 次 Azure Cielo™實時熒光定量PCR系統在檢測低拷貝端粒基因的應用 2021-11-24
我們都知道在實時定量PCR（qPCR）中，可以通過Cq值和標準曲線得出樣本的初始拷貝數。但Cq值與樣品中靶標的拷貝數有關，也會受到PCR反應的效率和儀器檢測靈敏度的影響。高靈敏度的儀器可以減少檢
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6803 次 一文攬盡：熒光定量PCR擴增曲線哪個階段最重要 2021-11-17
qPCR擴增曲線一般分成四個階段：基線期、指數期、線性期和平臺期。那么每個階段PCR產物量的變化都有什么區別呢？哪個階段最重要呢？小編這就一一道來。基線期PCR起始時，剛開始前幾個循環的熒光
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2455 次 針對新手專用PCR原理講解與分析 2021-11-9
什么是實時熒光定量PCR（qPCR）?在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，最后通過Cq值和標準曲線對起始模板進行定量分析的方法。一．使DNA產物發出熒光的常用標記方
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1991 次 Azure Cielo™ 實時熒光定量PCR系統在快速可靠地檢測新冠病毒的應用 2021-11-3
在應對病毒性大流行疾病時，為了有效控制病毒傳播和減少感染人群，快速且可靠的診斷是至關重要的。那么目前檢測COVID-19的 "黃金標準 "依賴于一種成熟的技術，即反轉錄定量聚合酶鏈反
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4825 次 新手須知的qPCR操作技巧詳解（下篇） 2021-8-26
上一篇文章跟大家介紹了qPCR實驗中引物設計及加樣的相關操作技巧，今天我們再跟大家分享其他的實用技巧，這些入門級知識一定要掌握牢固哦。1、陰性對照的技巧：陰性對照一般是指用水代替模板的反
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20490 次 MeRIP-qPCR方法原理、結果含義、展示方法及應用細談 2021-8-10
m6A等RNA修飾的主要研究手段是通過MeRIP方法對發生修飾的片段進行富集，其后進行高通量測序分析修飾位點。而無論是一篇僅展示修飾位點分布特點的譜學文章，還是深入研究修飾調控基因表達機制的文
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2986 次 PCR Efficiency在線分析工具在預測PCR擴增效率的使用 2021-7-30
目前已開發多種工具可以進行PCR引物的設計，但大多數工具只考慮避免發夾結構形成、3'末端核苷酸的選擇、引物解鏈溫度等問題，并沒有考慮內在擴增子的特征以及沒有預測給定擴增子和引物對的P
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4935 次 新手須知的qPCR操作技巧（上篇） 2021-7-30
實時熒光定量 PCR（qPCR）自問世以來，就受到了廣大生命科學實驗工作者和醫院檢驗工作者的極大關注，使得該技術得到了很快的普及。雖然qPCR技術目前應用方向十分廣泛，但是仍碰到很多用戶在實驗
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54991 次 熒光定量PCR實驗流程中常見的陰性對照與陽性對照介紹 2021-7-15
什么鬼？實驗結果又不理想，Ct值怎么又這么大呢？是哪一步出現了問題呢？哎哎哎，怎么沒有擴增曲線呢？在您看到熒光定量 PCR 實驗結果時，是不是也發出過這樣的疑問呢？總感覺哪個實驗步驟出現了
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8711 次 qPCR性能分析的四大要素-效率、線性動態范圍、檢測限和精密度 2021-6-28
MIQE指南中明確提出，進行qPCR實驗時必須測定以下檢測性能特點：PCR的效率、線性動態范圍、LOD和精密度。1、PCR的效率：強大和精確的qPCR測定通常具有高效率。在報告目的基因相對于參照基因的mR
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4179 次 實時熒光定量PCR引物設計原則中擴增子大小對qPCR產量影響的應用 2021-6-11
一般情況下，實時熒光定量PCR引物設計原則中會提到擴增子大小對實時熒光定量PCR的擴增效率有一定作用。所以通常建議使用相對較短的擴增子長度，范圍為50到150個堿基對（bp）。由于小片段不太容易
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3782 次 MIQE中核酸質量控制環節的操作簡易說明 2021-6-3
RNA樣本：比較不同的樣本時，應保證各樣本中含有大致相同量的RNA，因此需要對所提取的RNA進行定量。常用的定量方法包括：分光光度法、熒光染料檢測、瓊脂糖凝膠電泳、毛細管凝膠電泳和3'：5
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4469 次 超敏一步巢式Taqman qPCR熒光核酸檢測技術的機理及應用優勢 2021-3-23
巢式PCR具有很高的靈敏度和特異性，但傳統的巢式PCR采用兩對引物，通過兩輪PCR，進行目標產物的擴增。這種操作的不便性，使得其高靈敏度的特性難以應用到快速檢測和臨床診斷中。在單管巢式PCR的
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2136 次 無需ROX校準的Azure Cielo™ Real-Time PCR光學系統的應用 2021-1-29
ROX是一種廣泛使用的惰性熒光染料，通常添加到qPCR反應液中以校正熒光信號。然而，隨著熒光技術在儀器中的發展，比如在Azure Cielo™實時熒光定量PCR系統，為了標準化而單獨使用染料的步驟
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